有一个法利赛人名叫尼哥底母，是犹太人的官员。因为法利赛人反对耶稣，质疑耶稣的救主身份，他白天不敢去见耶稣，怕被同党看见。于是某天他趁着夜色到耶稣的住所，想接受他的教导。他非常虔诚地对耶稣说：“拉比，我们知道你是由神派来做我们老师的，因为如果没有神与你同在，你不可能行那么多的神迹。”
耶稣跟他讲了重生问题，说：“我实实在在地告诉你，世人如果不重生，就不能见到神的国。”尼哥底母感到不可理解，问道：“一个年纪很大的人怎能重生呢？难道要再进母亲肚子里，重新被生出来吗？”
耶稣解释道：“我实实在在地告诉你，从父母所生的人只是得到了肉身，而从圣灵所生的才能分享圣灵。人如果不从圣灵和水里重生，就不能进入神的国。对我所说的‘你们必须重生’，你不要感觉奇怪。你能听到风吹的声音，却不知道风是来自哪里又要吹向哪里。那些从圣灵重生的道理，同样是你所不能理解的。”
尼哥底母对耶稣的话感到稀奇，就又问道：“怎么能有这样的事呢？”耶稣回答：“你是一个以色列人的先生，怎能不明白我的意思呢？我实实在在地告诉你，我所讲的、所见证的都来自神。我跟你讲地上的事情，你尚且不能领受，如果讲天上的事情，你就更不明白了。除了人子之外，没有人登过天国的门。人子来到世间，就是要让信他的人得救。”
接着耶稣又向他讲神的慈爱，说：“神爱世人，甚至将他的独生子赐给他们，叫一切信他的不至灭亡，反得永生。凡信神的人都有救了，而那些不信的人，罪已经定下了。真理之光来到人间，就是要招聚那些行真理的人。罪恶的人不认得人子，他们不仅不认得真理之光，反而去追逐黑暗。定他们的罪，依据就在于此。”
耶稣和尼哥底母的谈话涉及两个重要教义：一个是重生，另一个是上帝之爱。关于前者，耶稣的重生观念强调灵魂得救，确立了基督教重视精神得救的独特拯救方式；关于后者，它一改《旧约》中上帝的严厉可畏形象，构成基督教与犹太教的重要分界线之一。
