（1）灭菌。可采用高压蒸汽灭菌，也可采用常压蒸汽灭菌。高压蒸汽灭菌，在147．1千帕压力下维持2小时；常压蒸汽灭菌，温度需达到100℃后持续灭菌8～10小时。
（2）接种。待培养料温度降至20℃左右时即可接种。接种之前要按接种操作程序先行消毒，然后在无菌条件下操作。原种先捣碎，再接入栽培瓶中，这样可使菌种较均匀地分布于料面。有条件的可采用自动接种机，每小时能接种1000瓶。
（3）培养。接种后的菌瓶移入培养室培养菌丝，或称发菌、养菌。室内温度控制在18℃～20℃。比较完善的培养室，应安装空调或其他制冷、增温设备，以便根据不同季节温度自动调节适合菌丝生长的最适温度。同时，在菌丝培养过程中，由于呼吸的作用，使室内二氧化碳的浓度增加，结果菌丝生长缓慢、稀疏。因此，在培养室的下方、离地面30厘米处，要开一个通气窗或安装电风扇，定期通风换气，增加培养室的氧气供给。
使用简单房屋作培养室，要保证室内干净，瓶子移入之前要进行消毒。房屋要有门窗，以便经常通风换气。同时，要根据外界自然温度的变化，尽可能给予适合菌丝生长的人工环境。简易房屋作培养室，一般没有培养架子，往往是将菌瓶堆积在一起。必须注意堆内温度的变化，应在堆内插温度计，每天观察3次，否则遇到高温易把菌丝烧坏。瓶堆不能太高，5～6层即可，还要经常开门窗通风换气。培养室的湿度控制在60％～65％。
