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第112章 附录(2)

可从翼下静脉或右侧颈静脉取血。

附录五常用实验动物麻醉药物用法与用量

———————————————————————————————————————————————————

药物常用浓度小鼠大鼠豚鼠家兔猫犬麻醉持续时间与特点

(g/100ml)

———————————————————————————————————————————————————

戊巴比妥钠40~50 40~50 40~50 25~30 30~40 25~30 2~4h,中途可补充

(2~3)(腹腔注射)(腹腔注射)(腹腔注射)(静脉注射)(腹腔注射)(静脉注射)首次剂量的1/3

30~40 30~40量,静注宜慢,肌

(腹腔注射)(腹腔注射)肉松弛不完全

硫喷妥钠25(腹腔注射)20~30 30~50 20~30 30min,用于手术动物,静

(2~4)40(腹腔注射)(静脉注射)(静脉注射)(静脉注射)注宜慢,临用现配8~12h,

苯巴比妥钠100~110 140~160 90~120需经5~20h才进入麻醉,麻醉

(10)(皮下注射)(腹腔注射)(静脉注射)较稳定

乌拉坦45~50 1000~1500 1000~1200 1000~1200 1200~1500 1000 2~4h,对呼吸和神

(25)(腹腔注射)(腹腔注射)(静脉注射)(静脉注射)(腹腔注射)(腹腔注射)经反射影响较小

1000~1500 1000~1500

(腹腔注射)(腹腔注射)

水合氯醛50~75 100~150 100~150 2~4h,小剂量抑制大脑皮质使动物镇静催眠;

(10)(静脉注射)(腹腔/静脉注射)(静脉注射)大剂量导致麻醉并抑制呼吸中枢

氯醛糖50~80 80~100 34 100 2~4h,对血管及神经反射影响较小

(腹腔注射)(静脉注射)(肌内注射)(灌胃)

15 60

(皮下注射)(静脉注射)

乙醇5 12~15 2~4h,静注宜慢

(30ml/100ml)(静脉注射)(静脉注射)

氯胺酮100~200 100~200 100~200 10~40 10~40 2~4h,对鼠类呼吸

(10)(腹腔注射)(腹腔注射)(腹腔注射)(腹腔注射)(腹腔注射)抑制显著

—————————————————————————————————————————————————————————————————

注:戊巴比妥钠需新鲜配置,久置低温下析出结晶,用时加热或每时10ml加入1mol/l的NaOH2(2下标)滴,即可溶解实用。

附录六常用营养液的组成和配制

成分生理氯化钠溶液Ringer溶液Lock溶液Tyrode溶液Kerb溶液De-Jalon溶液

NaCl 9g 6.5g 98 8g 6.9g 9g

153.99mmol 111.21mmol 153.99mmol 136.88mmol 118.06mmol 153.99g

KCl 0.14g 0.42g 0.2g 0.35g  0.42g

1.88mmol 5.36mmol 2.68mmol 4.69mmol 5.63mmol

MgSO4(4下标)·7H2(2下标)O   0.26g   0.29g

0.96mmol 1.07mmol

NaH2(2下标)PO4(4下标)·2H2(2下标)O 0.0065g 0.065g

0.042mmol 0.42mmol

KH2(2下标)PO4(4下标)0.16g

1.18mmol

NaHCO3(3下标)0.2g 0.05g 1g 2.1g 0.5g

2.38mmol 5.95mmol 11.9mmol 24.99mmol 5.95mmol

CaCl2(2下标)0.12g 0.24g 0.20g 0.28g 0.05g

2.16mmol 4.32mmol 3.60mmol 5.06mmol 1.08mmol

Glucose 2g 1g 1g 2g 0.5g

11.1mmol 5.5mmol 5.5mmol 11.1mmol 2.77mmol

通气空气氧气空气或氧气氧气+5%二氧化碳氧气+5%二氧化碳

用途哺乳类小量静脉注射蛙类器官组织哺乳类心脏等哺乳类肠肌哺乳类及鸟类各种组织大鼠子宫

—————————————————————————————————————————————————————————————————

注:1.配置氯化钙溶液时,必须先将氯化钙溶解后,才能与其他成分配成的溶液相混合,否则会产生沉淀。

2.葡萄糖于临用前加入,以免细菌生长。

附录七常用药物量和浓度的单位

┏━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━┳━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━┓

┃L升(1L=1000ml)┃kg千克(1kg=1000g)┃

┣━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━╋━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━┫

┃dl分升(10(上标-2)L)(1dl=100ml)┃g克(1g=1000mg)┃

┃ml毫升(10(上标-3)L)(1ml=1000μl)┃mg毫克(10(上标-3)g)(1mg=1000μg)┃

┃μl微升(10(上标-6)L)(1μl=1000nl┃μg微克(10(上标-6)g)(1μ=1000ng)┃

┃nl纳升(10(上标-9)L)(1nl=1000pl)┃ng纳克(10(上标-9)g)(1ng=1000pg)┃

┃pl皮升(10(上标-12)L)┃pg皮克(10(上标-12)g)┃

┃m米(1m=1000mm)┃mol/L摩尔每升(1mol/L=1000mmol/L)┃

┃cm厘米(10(上标-2)m)(1cm=10mm)┃mmol/L毫摩尔每升(10(上标-3)mmol/L)┃

┃mm毫米(10(上标-3)m)(1mm=1000μm)┃μmol/L微摩尔每升(10(上标-6)mol/L)┃

┃μm微米(10(上标-6)m)(1μm=1000nm)┃nmol/L纳摩尔每升(10(上标-9)mol/L)┃

┃nm纳米(10(上标-9)m)┃ppm百万分之一┃

┗━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━┻━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━┛

(刘倩刘群丽)

附录八细胞培养常用溶液和培养液制备

一、平衡盐溶液(Bss)

1.按表1配方准确称量各种试剂

表1常用Bss配方(单位为g/L)

试剂PBS Earle Hanks D-Hanks

NaC 8.00 6.80 8.00 8.00

KCI 0.20 0.40 0.40 0.40

CaCl2(2下标)-0.02 0.14-

MgSO4(4下标)·7H2(2下标)-0.2 0.2-

Na2(2下标)HPO4(4下标)·H2(2下标)1.56-0.06 0.06

Na2(2下标)H2(2下标)PO4(4下标)·2H2(2下标)O-0.14--

KH2(2下标)PO4(4下标)0.20-0.06 0.06

NaHCO3(3下标)-2.20 0.35 0.35

葡萄糖-1.00 1.00-

酚红-0.02 0.02 0.02

2.配制方法

配制BSS时应注意避免钙、镁离子的沉淀,以Hanks液为例说明BSS配制方法:按表1配方精确称量试剂,如含水分子与配方不同,应换算后称量。先将氯化钙溶解在100ml水中,其他试剂依次溶解在750ml水中,用数滴质量浓度为56g/L的碳酸氢钠溶液溶解酚红。将氯化钙溶液缓缓倒入上述750ml试剂溶液中,并不时搅动,防止出现沉淀。随即加入酚红溶液后,移入1000ml容量瓶内,加水至刻度。分装后置压力蒸汽灭菌器内115℃灭菌30min,4℃保存。细胞培养用溶液所用的水均指使用玻璃蒸馏器新鲜制各的三次蒸馏水。

二、消化液

1.胰蛋白酶溶液(质量浓度为2.5g/L)

胰蛋白酶粉2.5g

D-Hanks液1000ml

充分搅拌溶解后过滤除菌,分装入瓶,置冷冻箱内保存。使用前置37℃水浴箱内溶解,用质量浓度为56g/L的碳酸氢钠溶液调节pH至7.2左右。

2.乙二胺四乙酸二钠(EDTA)溶液

氯化钠8.0g

氯化钾0.2g

磷酸氢二钠1.15g

磷酸二氢钾0.2g

EDTA 0.2g

水1000ml

将前四种试剂溶解后加入EDTA,搅拌溶解,过滤除菌或置压力蒸汽灭菌嚣内115℃灭菌30min,分装入瓶,4℃保存。

三、四唑盐(MTT)染色液

MTT 0.5g

PBD液100 ml

搅拌溶解,置压力蒸汽灭菌器内115℃灭菌30min,4℃保存。

四、RPMI 1640细胞培养液

RPMI 1640干粉培养基规定剂量

碳酸氢钠规定剂量

L-谷氨酰胺(根据包装袋上说明添加)规定剂量

水1000ml

将培养基干粉溶于总量1/3的水中,搅拌溶解后补加水至1000ml。根据包装袋上说明添加碳酸氢钠和L-谷氨酰胺,搅拌溶解。加入抗生素,最终浓度为青霉素100U/ml,链霉素100U/ml。过滤除菌,分装后4℃保存。使用前加入胎牛血清(或小牛血清)100ml/L,pH调至7.2~7.4。

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